本期皮损为硬下疳，为1cm左右单发的圆形或椭圆结节，境界清楚，基底深在硬度似橡皮或软骨样，无自觉疼痛或压痛；表面平坦，浸润明显，中央有溃疡，初期淡红色，晚期变为灰色;硬下疳疮面分泌物多为浆液性，内含大量螺旋体，传染性很强;个别病人可以出现2个以上的硬下疳，但少见。硬下疳发生在男性冠状沟、包皮内侧、龟头、阴茎、尿道外口等处，女性则主要出现在阴唇系带、阴唇及宫颈。男性同性恋或双性恋者硬下疳常出现在肛门或直肠。也可出现于口唇、舌部、咽部、乳房、手背等其它部位。 在未经治疗的情况下，硬下疳多数在3～6周左右自行消退，留下一个浅表性瘢痕或色素沉着斑。如果采用有效的趋梅治疗，硬下疳可以很快消退。 硬下疳出现一周后局部淋巴结开始肿胀，又称梅毒性横痃，以两侧腹股沟淋巴结受累最常见。淋巴结黄豆到手指头大小，质硬，无自觉疼痛及压痛，不融合，非化脓性，无粘连。如果硬下疳发生于其它部位，可以出现非对称性淋巴结肿大。

2、梅毒血清学检测（Serological Tests for Syphilis, STS） 梅毒血清学检测用以辅助诊断。血清学检测尚不能区分梅毒螺旋体和其他螺旋体，因此除非病历显示患者已经接受过正规的梅毒治疗，任何 STS 阳性患者都应该接受等同于梅毒的检查和治疗。

1）非梅毒螺旋体实验（Non-treponemal Tests，NTT） NTT 常用的有甲苯胺红不加热血清实验（TRUST）、快速血浆反应素实验（RPR）、性病研究实验室实验（VDRL）。NTT 采用含有心磷脂、卵磷脂、胆固醇等成分的混合抗原检测梅毒螺旋体感染后机体内产生的异嗜性抗体（非螺旋体特异性抗体）；为手工操作，费用低廉、操作简单，具有相对较好的灵敏度。一期梅毒出现硬下疳后 10-15 天 NTT 可呈阳性（感染后约 6 周左右），未经治疗的梅毒患者，NTT 滴度在感染后 1-2 年达到高峰，之后降低，直至晚期梅毒呈低水平阳性。三期梅毒发生自发性 NTT 血清学转换是极其罕见的。 NTT 滴度总体上与疾病活动度有关，因此在 NTT 应定量报告。 

2） 梅毒螺旋体实验（Treponemal Tests，TT） TT 常用的有梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA）、梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）、梅毒螺旋体微血凝试验（MHA-TP）、荧光螺旋体抗体吸收实验（FTA-ABS）、酶联免疫吸附实验检测梅毒螺旋体抗体（EIA-TP）、化学发光免疫测定梅毒螺旋体抗体（CIA-TP）、梅毒螺旋体 IgG 抗体免疫印迹法等。TT 大多采用重组抗原检测血清中存在的螺旋体特异性抗体（IgG 和 IgM 混合抗体）。 TT 中，FTA-abs 目前已弃用，其操作费时、费用昂贵、结果不易解读。TPHA 和 TPPA 均为手工操作，肉眼判读结果，因此易受人为因素干扰。EIA-TP 和 CIA-TP 均可自动化检测、但是费用较高。 梅毒感染者硬下疳出现后 7-14 天 TT 可呈阳性。 TT 滴度对现症梅毒的诊断和治疗没有意义，也不能用于梅毒活动度的检测和疗效评价。 大多数梅毒感染者，TT 呈终身阳性。 

3 ）特异性 TP-IgM 检测 特异性 TP-IgM 检测有：EIA-IgM 法、19S-IgM-FTA-abs 法、TP-IgM 免疫印迹法等，在活动性梅毒中的检测灵敏度较低，对梅毒分期和决定治疗时间无意义。其主要意义在于新生儿先天梅毒的辅助诊断和脑脊液检测。 

4 ）PCOT 检测 POCT 方法可以同时检测梅毒螺旋体抗体和非梅毒螺旋体抗体。相比传统检测方法，早期 POCT 方法检测梅毒螺旋体抗体的灵敏度略低，目前一些 POCT 方法的灵敏度已大幅度提高、具有较好的检测性能。在可以进行实验室检测 STS 的医疗机构中不推荐使用 POCT 法用于梅毒的血清学检测。